Pomoc - ClustalW2
- WPROWADZENIE
Porównywanie wielu sekwencji białkowych jest ważnym narzędziem w analizie sekwencji. Podstawow? informacj? kt?r? dostarcza nam to narz?dzie jest identyfikacja konserwatywnych region?w. Jest to bardzo u?yteczne w nowatorskich eksperymentach testowania i modyfikacji funkcji okre?lonych bia?ek i przewidywania ich funkcji i struktury, a tak?e identyfikacji nowych bia?ek.
Sekwencje mog? by? dopasowywane w ca?o?ci (global alignment) lub na podstawie okre?lonego regionu (local alignment). Ca?kowite dopasowanie (global alignment) wymaga zdefiniowania przerw (wyra?aj?cych insercje/ delecje), podczas lokalnego dopasowania (local alignment) mo?na to pomin??, gdy? zostaj? dopasowywane regiony pomi?dzy przerwami. ClustalW jest całkowicie automatycznym programem do globalnego porównywania wielu sekwencji białkowych oraz DNA.
ClustalW2 Nukleotydowy wstęp
ClustalW2 Proteinowy wstęp
Do dodatkowej pomocy ClustalW2 widzimy:
- TWOJA SEKWENCJA
Upewnij si?, ze Twoja sekwencja ma inna nazw? (wa?nych jest 30 pierwszych znak?w nazwy). Na przyk?ad. Kliknijtutaj ?eby dowiedzie? si? wi?cej na temat b??d?w sekwencji.
ClustalW2 obecnie popiera 7 = format?w por?wnania sekwencji. S?:
Wi?ksza ilo?? format?w sekwencji
Please remove any white space space or empty lines =rom the beginning of your input.
No bootstrap analysis allowed via the =ebsite as it is is too cpu intensive. It is possible to perform bootstrap =nalysis or to get the Bootstrap values along with the nodes of each branch of the =hylogram, to do this you will need to download the software (available from the =lustal page) and run this locally. - TW?J E-MAIL
Musisz wpisa? sw?j adres emailowy w to okno tekstowe je?li wysy?asz swoja prac? przez email. Nie jest konieczne wype?nianie tego pola je?li pracujesz interaktywnie.
- TYTU? DOPASOWANIA
Tytu? pracy- mo?esz wpisa? tekst, jaki chcesz, aby pom?g? Ci zidentyfikowa? rezultaty Twoich badan.
- WYNIKI
Opcja ta pozwala ci wybra? pomi?dzy poczt? elektroniczn? a interaktywnymi dzia?aniami. Po wpisaniu swojego adresu email b?dziesz otrzymywa? wyniki poczt? elektroniczn? np. joe@somewhere.domain.country
.
- Dopasowanie
Mo?esz wybra? ca?kowite por?wnanie lub u?y? ?cis?ego algorytmu do tworzenia drzewa przewodniego lub ?cis?ego algorytmu.
- OUTPUT
Tutaj decydujesz kt?ry format wyj?ciowy chcesz u?y? do por?wnania sekwencji. Dost?pne opcje to ALN, GCG, PHYLIP, PIR i GDE. Wyj?ciowe wyniki s? przechowywane w pliku ALNkt?ry zawiera wyniki w formacie ALN. =BR>. Mo?na skonfigurowa? przegl?dark?, aby automatycznie ?adowa? pliki z wynik?w ClustalW. Oto kr?tka lista URL w celu uzyskania takich aplikacji dla Win95, Maki i UNIX pola:
- belvu - UNIX wiele dopasowa? sekwencji =iewer -
http://www.cgr.ki.se/cgr/groups/sonnhammer/Belvu.htm=
- njplot - UNIX, Mac & PC - Tree viewer
-
http://pbil.univ-lyon1.fr/software/njplot.html
- GeneDoc - GCG MSF file viewer -
(NB - Use =CG format in the OUTPUT option) -
http://www.psc.edu/biomed/genedoc/
- TreeView - Tree viewer for Macs and PC =running Windows) http://taxonomy.zoology.gla.ac.uk/rod/treeview.html<=A>
- ClustalX - Graphical Interface =-Windows/Mac/Win9x based version of ClustalW
ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/software/clustalw2/
<=R>- ClustalW2 - Command line =ersion
ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/software/clustalw2/
<=R>- CINEMA -
A Colour INteractive =ditor for Multiple Alignments
http://www.bioinf.man.ac.uk/dbbrowser/CINEMA2.1/=20
- EMMA-
An EMBOSS interface to =lustalw.
http://www.emboss.org/ - GeneDoc - GCG MSF file viewer -
Musisz skonfigurowa? twoja przegl?darka tak by zaj?a si? nast?puj?cymi niezarejestrowany plikami MIME: =
- application/x-tree njplot %s (lub co? w tym stylu wybierasz typ MIME
- application/x-align belvu %s (lub co? w tym stylu wybierasz typ MIME
JalView:Nowa do?wiadczalna opcja zosta?a dodana do rezultat?w strony, kt?ra wymaga?a korzystania z aplet?w Javy zwanej JalView. This is = fully To jest edycja MSA w pe?ni przedstawiana, kt?ry pozwala ci nie tylko redagowa? ustawienie w dopasowania lecz tak?e, wymieni? formaty ustawienia w dopasowaniu. Prosz? zauwa?y? , ?e JalView jest poni?ej rozwoju. Dla dokumentacji prosz? odwiedza? oficjaln? witryn? internetow? przy http://www.jalview.org. http://www.jalview.org/.
- belvu - UNIX wiele dopasowa? sekwencji =iewer -
http://www.cgr.ki.se/cgr/groups/sonnhammer/Belvu.htm=
- OUTORDER
Decyduje kt?ra sekwencja powinna by? por?wnana.
- Kolor
Poka? kolory
Je?li przyci?niesz przycisk oznaczony ?Show colors? por?wnania b?d? pokazane w okre?lonych kolorach w tabelce.
UWAGA: Ten wyb?r tylko pracuje kiedy wy wybrali?cie *ALN* albo *GCG* jak format produkcji.
AVFPMILW RED Small (small+ hydrophobic (incl.aromatic -Y)) DE BLUE Acidic RK MAGENTA Basic STYHCNGQ GREEN Hydroxyl + Amine + Basic - Q Others Gray
Hide Colors
Przycisk 'Hide Colors' jest okazany na stronie w wynikach "guzik kolor?w" by? pokazany. Ten wyb?r b?dzie pokazywa? wyr?wnywanie w normalnym tekscie z ?adnych kolor?w.
Brak wyr?wnania nie jest zaznaczony kolorem. =
CONSENSUS SYMBOLS:
Ustawienie w dopasowaniu i ustawieniu w domy?le symbole oznaczaj?ce, ?e stopie? ochrony zauwa?y? w ka?dej kolumnie
"*" spos?b ?e osady albo nukleotydy w tej kolumnie s? identyczne we wszystkich seriach w ustawieniu w dopasowaniu.
":" Oznacza to, ?e zachowane zast?pstw by?y przestrzegane, zgodnie z BARWA tabeli powy?ej.
"." spos?b ?e semikonserwatywna substytucja jest zaobserwowana. =BR>
Wi?cej na sekwencje/dopasowanie format?w
- OPCJE SZYBKIEGO DOPASOWANIA W PARACH:
- KTUP
ten wyb?r pozwala wybra? ci d?ugo?? s??w u?ywanych podczas obliczania ALIGNMENT.
- WINDOW
U?ywa si? tej opcji do wyboru wielko?ci okna
- SCORE
Opcja ta pozwala ci decydowa? kt?ry wynik u?yjemy do kalkulacji
- TOPDIAG
Tutaj wybierasz jak du?o szczytowych przek?tnych powinno by? zintegrowanych podczas liczenia por?wna?
- PAIRGAP
Wybierz t? opcj? by ustali? kary za przerwy
- KTUP
- MULTIPLE SEQUENCE ALIGNMENT OPTIONS:
- MATRIX
s?u?y do wyboru serii matryc kt?rych uzywasz do generowania por?wna?.w Program przeszukuje seri? matryc, mierzy odleg?o?ci pomi?dzy aminokwasami.
- BLOSUM (Henikoff).Matryca ta pokazuje najlepiej dost?pne bazy danych
- PAM (Dayhoff).Od lat 70-tych ma szerokie zastosowanie.
- GONNET.. Opiera si? na podobnych zasadach jak Dayhoff, ale jest znacznie cz?ciej aktualizowany
Dostarczama identyczno?ci matrycy (matrycowy) kt?ry daje wynik od 10 do dw?ch identycznegoaminokwas?w i wynik zero (zerowy) inaczej.
Default values are: =BR>
- DNA: DNA Identity matrix.
- Protein: Gonnet 250.
- BLOSUM (Henikoff).Matryca ta pokazuje najlepiej dost?pne bazy danych
- GAPOPEN
Umieszcza si? tutaj sankcje karne za przerwy
- DNA: 15.0
- Bia?ka: 10.0
- NO =NDGAP
Umieszczana ta warto?? tak wy??cza? koniec przerw.
Brak =arto?ci
- GAPEXT
Umieszcza si? tutaj sankcje karne za przed?u?enie przerwy.
Brakuj?ce warto?ci:
- DNA: 6.66
- Protein: 0.2
- GAPDIST
Kary za oddzielenie przerw
Brakuj?c? warto?ci? jest 4.
Wi?cej o przerwach..
- MATRIX
- ITERATION
Maksymalna liczba interakcji do wype?nienia.
- NUMITER
Usuni?ty pierwszy plan iteracji zosta? dodany. To mo?e by? u?yty do poprawiania ostatnich ustawie? w dopasowaniu albo poprawia? ustawienie w dopasowaniu w ka?dym etapie z post?powania ustawienia w prostej linii. Podczas kroku iteracji ka?dy ci?g jest usuni?ty z kolejki i wyr?wnany. Je?li wynik?e ustawienie w prostej linii jest lepsze ni? uprzedni, ustawienie dopasowania jest zatrzymane. Ten proces powt?rzy si? do wyniku je?li jest zbie?ny albo do czasu gdy maksymalna liczba iteracji jest dostateczna. U?ytkownik mo?e powtarza? przy ka?dym kroku post?powego ustawienia dopasowania przez umieszczanie parametru iteracji do Drzewa albo w?a?nie na ostatnim ustawieniu dopasowaniu przez parametr iteracji do ustawienia dopasowania. Nieuiszczenie nale?no?ci nie jest ?adn? iteracj?. Maksymalna liczba iteracji mo?e by? ustalonya u?ywaniem parametru numiter. Domy?lna liczba iteracji jest 3.
- Przyk?ad =BR>
Samouczek na dopapasowanie sekwencji
Samouczek dopasowania sekwencji proteinowej
- REDAGUJ?C USTAWIENIE DOPASOWANIA
Mo?esz redagowa? ustawienia dopasowaniajalview. Kliknij na przycisk poni?ej by obejrze? ustawienie dopasowania.
- DRZEWO FILOGENETYCZNE
Phylogram jest rozga??ziaj?cym si? diagramem obj?ty ocen? filogeneza, d?ugo?ci ga??zi s? proporcjonalne do ilo?ci wywnioskowanej ewolucyjnej zmiany. Kladogram jest rozchodz?cym si? diagramem (drzewo) obj?ty ocen? filogenezy gdzie ga??zie s? z r?wnej d?ugo?ci, w ten spos?b kladogramy pokazuj? wsp?lne pochodzenie, ale nie wskazuj? ilo?ci ewolucyjnego "czasu" dziel?c taksomy. Odleg?o?ci drzewa mog? by? wykazane, wystarczy klikn?? na diagramie menu opcji. ". Dnd" plik jest plikiem, kt?ry opisuje filogenetyczne drzewo.
S? w ?rodku teraz kontrolowane przez nowe przyciski w pliku wyj?ciowym jak r?wnie? podnosz? w g?r? menu, to jest dost?pne klikaj?c prawym przyciskiem. Guziki na stronie obejmuj? "Poka? jako =hylogram Tree", "Poka? jako Kladogram" i "Poka? dystans".
IMPORTANT!
Please note =pplets are not printed out with html pages, You will need to:
- Use the "Print Screen" button in the top right corner of your
keyboard.
- Open an imaging application like paint or photoshop.
- Go "file>new" from the menu or "control+N"from the keyboard =o create
a new image.
- Go "edit>paste from the menu or "control+V"from the keyboard =o paste
your screen capture.
- The use the crop function to trim the image (e.g.
"image>crop").
- Then save or print the image.
- Use the "Print Screen" button in the top right corner of your
keyboard.
The vendor and version from the JVM:You should see a pink box above with one line of text that says = something like: Java =ersion: 1.1.4 from Microsoft Corp. or Java Version 1.4.2_05 from =un Microsystems Inc. or Java Version: 1.3.1 from =pple Computer, Inc. or Java Version: 1.1.5 from Netscape Communications Corporation For actual results, see expected output. |
Example of enabling =ava in Internet Explorer (Windows)
Examples of Enabling Java in Firefox =Windows/Linux)
Example of Enabling java in Mozilla (Windows)
Example of Enabling java in Safari (Mac)
example:
Right-click =n the area below for options!
IMPORTANT:
To use this =ption you will need to input a sequence alignment. Please make sure this =lignment is in PIR or PHYLIP format. ALN and GCG MSF files are not supported so you =ill have to convert your MSF files to PIR format with, for example, GCG's =oPir:
topir pileup.msf{*} -outf=pileup.pir
Please refer to the GCG =ocumentation to find out how to use this program correctly. You may then use this =ile as input (cut and paste or upload) to this service.
The method used =s the NJ (Neighbour Joining) method of Saitou and Nei. First you calculate =istances (percent divergence) between all pairs of sequence from a multiple =lignment; second you apply the NJ method to the distance matrix.
This option =llows you to choose the following output formats for the tree:
In order to view these trees you must =ave a program capable of displaying the data. Please refer to this pages =ection on OUTPUT=for more information.
- Neighbour
- Phylip
- Distance
- Kimura =orrection of
distances
This options allows you to set on distances =orrection (correction for multiple substitutions). This is because, as sequences = diverge, more than one substitution will happen at many sites. =owever, you only see one difference when you look at the present day sequences. =herefore, this option has the effect of stretching branch lengths in trees =especially long branches). The corrections used here (for DNA or proteins) are =oth due to Motoo Kimura.
- Ignore Gaps =n
alignment
With this option, any alignment positions where =NY of the sequences have a gap will be ignored. This means that 'like' will =e compared to 'like' in all distances. It also, automatically throws =way the most ambiguous parts of the alignment, which are concentrated around =aps (usually). The disadvantage is that you may throw away much of the =ata if there are many gaps.
- CLUSTERING
NJ or UPGMA. The UPGMA =lgorithm has been added to allow faster tree construction. The user now has the =hoice of using Neighbour Joining or UPGMA. The default is still NJ, but the =ser can change this by setting the clustering parameter.
Method used to = construct the phylogenetic tree:
- NJ: Neighbour-joining (Saitou and Nei 1987)
- UPGMA: Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean (Sneath =nd
Sokal 1973)
References
"The neighbor-joining method: a new method for reconstructing phylogenetic trees."Mol. Evol. Biol 4(4):406-425
"Numerical taxonomy - the principles and =ractice of numerical classification."(W. H. Freeman: San Francisco.)
- UPLOAD A
FILE
You may upload a file from your computer which =ontaining a valid set of sequences in any format (GCG, FASTA, EMBL, GenBank, PIR, NBRF, Phylip or UniProtKB/Swiss-Prot) using this option. Please =ote that this option only works with Netscape Browsers or Internet Explorer =ersion 5 or later. Some word processors may yield unpredictable results as hidden/control characters may be present in the files. It is best to =ave files with the Unix format option to avoid hidden windows characters. =ome examples of common sequence formats may be seen here.
- SCORES
TABLE
Scores Table is a new view to ClustalW output. =sers can sort the scores by Alignment Score, Sequence Number, Sequence Name and = Sequence Length.
- REFERENCES
ClustalW and ClustalX version 2.Bioinformatics 2007 23(21): 2947-2948.abstract full-text PDF
A Colour INteractive Editor for Multiple =lignments - CINEMA.EMBnet.news, 3 (3).
The clustalWWW server at the EBIembnet.news volume 4.2http://www.ebi.ac.uk/embnet.news/vol4_3/clustalw1.ht=l
CINEMA - A novel Colour INteractive Editor for =ultiple Alignments.Gene 211(2): GC45-GC56.abstract http://www.bioinf.man.ac.uk/dbbrowser/CINEMA2.1/=20
CLUSTAL W: improving the sensitivity of =rogressive multiple sequence alignment through sequence =eighting,position-specific gap penalties and weight matrix choice.Nucleic Acids Research 22: 4673-4680.abstract
ClustalW2 WWW Service at the European =ioinformatics Institutehttp://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw2/ =BR>
The program in use in this service can be =btained freely from:http://www.sgi.com/chembio/resources/clustalw/parall=l_clustalw.html
Jalview - a java multiple alignment =ditorhttp://www.jalview.org/
pfaat (Protein Family Alignment Annotation =ool)http://pfaat.sourceforge.net/
- OTHER SERVICES:
This =ervices is also available as an application from the EBI's srs server: http://srs.ebi.ac.uk/
N.B. DbClustal can be launched from WU-BLAST2 and NCBI-BLAST2 you can choose some of the =equences from your score list and align them with your query sequence. You may also =hen paste your .aln files back into ClustalW (bootstrapping) in order to =A =ref="http://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw2/help.html#color">colour =our alignments, view the phylogenetic=20 trees or launch jalview.
=BR>